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                解決胎牛血清使用中的常見問題

                更新時(shí)間:2018-02-02      點(diǎn)擊次數(shù):2274
                   1、 如何儲(chǔ)存和解凍胎牛血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
                  將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
                  長時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。
                  我們建議胎牛血清應(yīng)保存在-2O ℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
                  2、胎牛血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
                  沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g ,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
                  3、實(shí)驗(yàn)室如何選擇適合的胎牛血清?
                  國內(nèi)一致認(rèn)為血清是的,但是根據(jù)我在北美的經(jīng)歷,所以并不是價(jià)格決定質(zhì)量,但是總的來說這兩種價(jià)格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國產(chǎn)的就夠用了 。此外,由于國內(nèi)HYCLONE ,GIBCO 并沒有生產(chǎn)線,我們只能從代理商那里買,而代理商又魚龍混雜,所以買到假貨的可能性也很大。所以,我一般會(huì)從直銷員那里買血清,有的國外生物公司由于剛剛進(jìn)入中國,度不高,但是其實(shí)在 國外已經(jīng)做得很不錯(cuò)了,如Wisent 等,他們?cè)趪鴥?nèi)有辦事處,我會(huì)從那里拿,血清的品質(zhì)和HYCLONE 不相上下,但價(jià)格相對(duì)優(yōu)惠很多。
                  4、 如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?
                  按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
                  (1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
                  (2) 血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
                  (3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
                  (4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
                  (5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
                  (6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
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